Instrumentación y Análisis Cuantitativo
El espectrofotómetro es el instrumento que descompone la luz en longitudes de onda específicas para medir la absorbancia. Consta de una fuente de luz, un monocromador para seleccionar la longitud de onda, cubetas para contener la muestra, y un detector que mide la luz transmitida.
La Ley de Lambert-Beer tiene limitaciones importantes: solo funciona con luz monocromática (una sola longitud de onda), a concentraciones bajas (soluciones diluidas) y cuando la absorbancia está entre 0,1 y 0,9. Fuera de estos parámetros, perderás precisión en tus mediciones.
Para determinar la concentración de una muestra desconocida, usamos una curva de calibración. Preparamos soluciones de concentraciones conocidas, medimos sus absorbancias, y graficamos absorbancia vs. concentración. Luego, al medir la absorbancia de la muestra problema, podemos interpolar para determinar su concentración.
💡 Consejo práctico: Siempre usa una "solución blanco" que contiene todos los reactivos excepto la sustancia a determinar. Esto elimina interferencias y asegura que mides solo lo que te interesa. ¡Este paso es crucial para obtener resultados confiables!